Q:保真性

A:具有3’→5’外切酶活性，保真性能比普通Taq聚合酶高80倍

Q:延伸速率

A:具有較高的延伸速率，在推薦的條件下大于每分鐘2kb

Q:用途

A:用于高保真、快速擴增目標DNA，環(huán)拉法引入點(diǎn)突變，補平DNA粘性末端等。

Q:活性定義

A:嗜熱菌DNA Polymerase的活性單位定義為：在推薦的緩沖反應體系中，以大馬哈魚(yú)精DNA為模板，68℃ 30分鐘內合成10nmol核酸所需要的酶量為1活性單位。

Q:質(zhì)量控制

A:經(jīng)酶切實(shí)驗檢測無(wú)外源核酸酶污染，PCR方法未檢測到宿主DNA殘留，-20℃存放一年，無(wú)明顯活性喪失。

Q:貯存溶液

A:50mM Tris-HCL（PH 7.6），50mM KCL，1mM DTT，0.1mM EDTA，50%（v/v）glycerol。

Q:PCR體系（可參考）

A:

Q:PCR程序（可參考-根據實(shí)際反應條件摸索優(yōu)化）

A:

Q:引物長(cháng)度

A:引物的適當長(cháng)度為20-35bp；過(guò)長(cháng)或者過(guò)短，需要優(yōu)化退火溫度

Q:GC含量高

A:如GC含量高，請使用GC buffer，對保真性沒(méi)有影響

Q:擴增基因組或GC含量較高時(shí)，什么溫度變性

A:建議每個(gè)循環(huán)98℃變性

Q:熱啟動(dòng)

A:Hotstart-KOD為熱啟動(dòng)修飾酶，需要高溫激活才有活性（98℃ 5min）