Q:耐受血液類(lèi)型

A:耐受25%全血

Q:這種直接PCR試劑盒，擴增產(chǎn)物可以做哪些實(shí)驗

A:PCR的產(chǎn)物可以通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳和EB染色進(jìn)行分析，進(jìn)行下游的常規操作，例如限制性酶切、DNA測序、dHPLC分析等

Q:直接PCR試劑盒適用于哪些領(lǐng)域

A:1、人類(lèi)、其他哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)基因分析；

   2、可用于常規檢測：限制性酶切、瓊脂糖凝膠電泳/EB染色、熒光毛細血管電泳、DNA測序或dHPLC分析；

   3、親自鑒定；

   4、SNP分析（限制性酶切）；

   5、臨床樣本檢驗。

Q:哪些樣本適用

A:新鮮血液、4℃保存2年以上EDTA康寧的全血、EDTA或肝素抗凝劑血、樣品拭棒、Whatman903濾紙等各種血液樣品

Q:操作流程、實(shí)驗步驟等與常規檢測方法有多少區別

A:除了無(wú)需進(jìn)行DNA抽提，其他手段兼容。

Q:PCR體系成分

A:分別加入模板、特異性引物、5*buffer、50*dNTP、0.5-1ul聚合酶，最后加入滅菌水至20ul，輕彈混勻；

Q:模板推薦多少拷貝量

A:10³-10⁶拷貝

Q:PCR反應參數設置

A:依據擴增產(chǎn)物而定，以2kb的擴增產(chǎn)物為例：94℃ 4min，35 cycles（94℃ 30sec，55℃ 30sec，72℃ 1min），72℃ 5min，4℃ soak。

Q:1kb以下片段，是否一樣操作

A:擴增1kb以下片段，30sec延伸即可，也可兩步法（引物長(cháng)度22-25bp，68℃退火延伸）