研究某個(gè)基因的功能最常用的手段是在宿主細胞中過(guò)量表達或者通過(guò)RNA干擾的方法knock-down該基因,常規手段有瞬時(shí)轉染和篩選穩定細胞 系。篩選出該基因的過(guò)表達或者RNA干擾的穩定細胞系會(huì )給您的實(shí)驗帶來(lái)極大的便利。有了穩定細胞系,后期的Co-IP或者Pull-Down實(shí)驗會(huì )非常便 利;穩定表達重組熒光蛋白的細胞系可以讓您動(dòng)態(tài)的觀(guān)察分子在細胞中的運動(dòng)。
篩選穩定細胞系有兩種方法:
1)轉染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩定細胞系;
2)慢病毒感染篩選穩定細胞系。慢病毒感染方法較質(zhì)粒轉染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩定細胞系篩選方法。我們提供病毒包裝服務(wù)(您可以自己完成穩態(tài)細胞篩選),或者一站式的穩定細胞系的篩選服務(wù)。
技術(shù)優(yōu)勢:
1、豐富的基因庫資源,節省了您的時(shí)間和金錢(qián)。
2、各種表達載體,多種啟動(dòng)子選擇,多種篩選標記,多種熒光選擇,多種熒光蛋白和目的基因的共表達方式,量身定做您需要的穩定細胞系,您可以在同一株細胞中過(guò)表達或者干擾掉多個(gè)基因,還可以給您提供調控表達的穩定細胞系。
慢病毒載體信息:
本公司慢病毒表達載體主要是世界上各個(gè)實(shí)驗室使用的主流載體,為哈佛醫學(xué)院、麻省理工學(xué)院等機構的知名實(shí)驗室構建(Science.2008 Jun 13.320(5882):1496-501.)。
可供選擇的目的基因與熒光蛋白的共表達方式有:融合表達;IRES連接和T2A peptide。
可供選擇的熒光蛋白有:EGFP,RFP和mcherry。
可供選擇的抗性篩選標記有:puromycin、hygromycin和Blasticidin。
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