Q:作用

A:UNG酶可選擇性水解斷裂含有dU的雙鏈或單鏈DNA中的尿嘧啶糖苷鍵，對RNA無(wú)活性，主要應用于PCR擴增產(chǎn)物的防污染。

Q:酶活性單位定義

A:在20mM Tris-HCL(PH8.0），1mM DTT,1mM EDTA反應液中，37°-50度條件下反應1小時(shí)，能夠降解1nmol含尿嘧啶的DNA所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。

Q:活性測試

A:在含dUTP不含dUTP的PCR產(chǎn)物中，加入或不加UNG酶，50°反應2分鐘，94°2分鐘滅活UNG酶，電泳檢測條帶。
結果顯示，在含dUTP的PCR產(chǎn)物中加UNG酶，50°反應2分鐘后，DNA被完全降解；在不含dUTP的PCR產(chǎn)物中加UNG酶，電泳譜帶不發(fā)生變化。

Q:酶儲存緩沖液配置

A:

Q:推薦實(shí)驗

A:本酶可作用于普通PCR反應液和RT-PCR反應液

Q:PCR反應體系配置實(shí)例

A:

Q:反應條件

A:50°反應2分鐘，94°處理2分鐘，隨后做PCR擴增

Q:反應溫度、時(shí)間；失活溫度、時(shí)間；是不是95°變性？55°是否可以失活?反應多久？

A:50°反應2分鐘，94度2分鐘失活。55度也可以失活，反應5min