Q:這種直接PCR試劑盒，擴增產(chǎn)物可以做哪些實(shí)驗

A:PCR的產(chǎn)物可以通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳和EB染色進(jìn)行分析，進(jìn)行下游的常規操作，例如限制性酶切、DNA測序、dHPLC分析等

Q:可以應用于哪些領(lǐng)域

A:1、人類(lèi)、其他哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)基因分析；

   2、可用于常規檢測：限制性酶切、瓊脂糖凝膠電泳/EB染色、熒光毛細管電泳、DNA測序或dHPLC分析

Q:適用樣品

A:新鮮或凍存的組織、細胞、病毒等樣品（保存良好的石蠟包埋樣品）

Q:樣品準備

A:1、組織或細胞一般不需要處理，取103-105左右的樣品直接PCR；

   2、石蠟包埋的樣品，建議加入5-10倍體積的預處理液中，55℃孵育過(guò)夜后，煮沸2-5min，取1-2.5ul樣品進(jìn)行PCR（2-5%總反應體積）；剩余樣品保存在-20℃

Q:反應體系

A:以20ul體系示例（20-50ul/reaction），在微量離心管中加入以下各種成分

Q:PCR反應參數設置

A:依據擴增產(chǎn)物而定，以2kb的擴增產(chǎn)物為例：94℃ 4 min，35 cycles（94℃ 30 sec，55℃ 30 sec，72℃ 1 min），72℃ 5 min，4℃保溫。

Q:我的片段大?。?kb

A:擴增1kb以下片段，30 sec延伸即可；也可采用兩步擴增法（設計引物長(cháng)度22-25bp，68℃退火延伸）