Q:SUMO蛋白酶識別位點(diǎn)
A:SUMO Protease(SUMO蛋白酶,又稱(chēng)ULP蛋白酶)能夠識別并且高效地將SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)從融合蛋白上切割下來(lái)。
Q:相比EK和TEV,SUMO蛋白酶的優(yōu)勢
A:相對于EK和TEV等蛋白酶的短小識別位點(diǎn),SUMO蛋白酶能夠識別完整的SUMO序列,所以SUMO蛋白酶酶切反應有很高的特異性,且在較寬范圍的反應環(huán)境體系中保持較高的活力,例如溫度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。
Q:sumo蛋白酶如何去除
A:SUMO蛋白酶具有多聚His標簽,便于融合蛋白切割后用NI-NTA(產(chǎn)品貨號PAN001)去除。
Q:SUMO Protease來(lái)源
A:自E.coli表達經(jīng)親和純化的重組蛋白酶。
Q:酶活性單位定義
A:在30℃條件下反應1小時(shí),能夠切割5ug的反應底物達90%以上所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。
Q:推薦反應體系
A:
反應物組成 | 體積 |
SUMO融合蛋白 | 100ug |
SUMO Protease | 2ul(10U/ul) |
10*SUMO Protease Buffer | 10ul |
ddH2O | 至100ul |
Q:不同溫度下的參考反應時(shí)間
A:
1、4℃反應15~16小時(shí) |
2、16℃反應4小時(shí) |
3、25℃反應1.5小時(shí) |
4、30℃反應1小時(shí) |
Q:蛋白酶純度
A:>95%,as determined by SDS-PAGE
Q:是否耐受2M尿素
A:耐受
Q:酶切效率如何?
A:sumo蛋白酶酶切特異性和酶切效率都很高
Q:sumo蛋白酶能否在細胞裂解液中使用或者在活細胞的狀態(tài)下使用
A:sumo蛋白酶在蛋白中使用,用于切割標簽。裂解液或活細胞的這兩種狀態(tài)都不推薦----雜質(zhì)太多,影響酶活性
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