Q：Anti-FLAG Mab Sepharose作用

A：可以用于帶FLAG標簽的蛋白免疫沉淀、蛋白純化等。

Q：抗體種類(lèi)

A：?jiǎn)慰寺】贵w

Q：抗體亞型

A：IgG

Q：來(lái)源宿主

A：小鼠（mouse）

Q：免疫原

A：KLH 交聯(lián)的多肽FLAG（DYKDDDDK）

Q：純度

A：將腹水經(jīng)硫酸銨分級沉淀純化、親和純化，純度>95%

Q：載量

A：1mg/mL

Q：產(chǎn)品形態(tài)

A：50%懸濁液，白色

Q：儲存溶液

A：PBS，pH 7.4，50% 甘油，0.02% (w/v) 疊氮化鈉

Q：應用于哪些實(shí)驗

A：1、可用于帶FLAG標簽的蛋白免疫沉淀
     2、可用于帶FLAG標簽的重組蛋白大量純化 

Q:如何裂解細胞

A:加入適量lysis buffer(含蛋白酶抑制劑)，裂解細胞。
   建議：在lysis buffer 中，加入全能核酸酶 benzonase，降解DNA和RNA，可以簡(jiǎn)化實(shí)驗、顯著(zhù)提高產(chǎn)物得率和實(shí)驗的重復性。

Q:裂解液可以用什么溶液

A:lysis buffer

Q:大腸桿菌-裂解

A:每1L培養的菌液加入10mL裂解液（40mM Tris-HCl，pH8.0，1% CHAPSO），含蛋白酶抑制劑，離心取上清

Q:哺乳動(dòng)物細胞-裂解

A:先用PBS潤洗細胞2次。每個(gè)培養皿（約106~107個(gè)細胞）加入1mL裂解液（50mM Tris-HCl，150mM NaCl，1%Triton X-10 ，pH7.4），每毫升裂解液可加入10 μL蛋白酶抑制劑混合物，離心取上清

Q:細胞裂解后如何處理

A:用lysis buffer洗滌FLAG--親和瓊脂糖三次

Q:加入多少sepharose beads

A:加入樣品量10%（V/V）左右的親和瓊脂糖

Q:加入sepharose后如孵育多久

A:4℃震蕩混合，2hr或者過(guò)夜

Q:如何洗滌sepharose（用什么洗滌）

A:洗滌親和瓊脂糖三次

Q:如何洗脫蛋白

A:用FLAG肽（或者0.1M Gly,pH3）洗脫目標蛋白

Q:如何再生

A:用0.1M Gly,pH3，洗滌2-3次（快速洗滌，長(cháng)時(shí)間會(huì )損壞抗體），再用PBS洗滌。

Q:是否可做純化

A:適用蛋白純化實(shí)驗

Q:如果需大量蛋白純化，如何實(shí)驗

A:大量蛋白純化，建議裝1-5mL親和柱，實(shí)驗方法和一般親和柱類(lèi)似