TEV Protease (煙草蝕紋病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是來(lái)源于煙草蝕紋病毒(TEV) Nla的重組蛋白酶，此蛋白酶被用來(lái)切除純化后融合蛋白的親和標簽。TEV蛋白酶具有很強的位點(diǎn)特異性，能夠識別EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，最普通的是ENLYFQG，其切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸或絲氨酸之間。該酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的廣泛范圍內皆有活性，使得反應條件的選擇可根據目的蛋白的情況而修改。該酶帶有His-sumo Tag經(jīng)6×His標簽純化，剪切反應完畢后可通過(guò)Ni-NTA His Bind Resin去除。本蛋白酶來(lái)源于大腸桿菌重組表達。

酶活性單位定義：在1X TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mMEDTA, 1mM DTT) 中，30℃條件下反應 1 小時(shí)，能夠切割 3 μg 的反應底物達 85%以上所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。

保存條件：-80°保存2年，或小量分裝后保存于-20°，可保存6個(gè)月，避免反復凍融。

待測融合蛋白100μg，加入TEV protease 2μl，4℃反應 16 小時(shí)，取酶切前后樣品SDS-PAGE檢測，如圖所示 >90% 融合蛋白被切割