---------核酸克星，DNA消消消！RNA消消消！
在CO-IP、蛋白提取或純化實(shí)驗中，很多時(shí)候，您的樣本都有不同程度的核酸污染，不注意便會(huì )出現各種各樣的問(wèn)題，如跑膠后背景高、蛋白樣本粘度高、蛋白產(chǎn)量低等。
今天，我們?yōu)槟扑]Benzonase Nuclease 全能核酸酶----適用于去除蛋白質(zhì)產(chǎn)品中的核酸污染、降低黏度、提高產(chǎn)量，它比超聲更徹底！比DNase/RNase酶更霸道！妥妥的為您排憂(yōu)解難！
應用：
◆ 蛋白提取時(shí)去除核酸污染：在重組蛋白純化或哺乳動(dòng)物細胞裂解物下游要求粘度較低的情況下，可以利用Benzonase核酸酶降低樣品粘度以利操作，提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量；
◆ 有效減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結塊現象；
◆ 有利于不可溶性蛋白復性前，高質(zhì)量包涵體制備；
◆ 有效去除帶負電荷的核酸對雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響；
◆ 可以用于蛋白抽提、蛋白純化、Western Blot、免疫沉淀等實(shí)驗。
簡(jiǎn)介：
全能核酸酶Benzonase Nuclease是來(lái)源于Serratia Marcescens 經(jīng)過(guò)基因工程改造的核酸酶。
它能夠在非常廣泛的條件下（6M urea, 0.1 M Guanidine HCl, 0.4% Triton X100, 0.1% SDS, 1 mM EDTA, 1 mM PMSF）, 降解所有形式的（雙鏈，單鏈，線(xiàn)狀，環(huán)狀）DNA和RNA。其活力比DNaseI強34倍，能以相同的效率酶切單鏈和雙鏈DNA和RNA，將核酸完全消化成3-8個(gè)堿基長(cháng)度的5'-單磷酸寡核苷酸。
全能核酸酶適用于去除蛋白質(zhì)產(chǎn)品中的污染，符合FDA關(guān)于核酸污染去除的規程。
特點(diǎn)：
★Benzonase可以與多種細胞細菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量；
★本公司全能核酸酶經(jīng)特殊工藝表達純化，無(wú)蛋白酶、內毒素污染，沒(méi)有標簽，方便下游實(shí)驗操作；
★在IP實(shí)驗中，在使用Protein A+G Sepharose Beads的同時(shí)，加入benzonase對去除核酸污染效果更佳；
★純度＞99%；
★活性遠高于進(jìn)口品牌產(chǎn)品。
（使用benzonase后，蛋白粘度明顯降低）
優(yōu)勢：
去除核酸的方式也有很多，如：超聲法、DNase/RNase酶法，全能核酸酶相比這兩種最常用的方法到底有什么區別呢？
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超聲法
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DNase/RNase酶法
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Benzonase全能核酸酶
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相似處
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可以破碎細胞或者組織
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DNase酶消化DNA
RNase酶消化RNA
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Benzonase可以消化所有DNA和RNA
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優(yōu)勢
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利用剪切力可在一定程度上降解核酸
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利用核酸內切酶活性，可在溫和條件下，較好的消化核酸
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一種酶即可降解所有形式的DNA和RNA，將DNA和RNA消化成3-8個(gè)堿基的單磷核苷酸；
可降低蛋白粘性、降低背景、提高蛋白產(chǎn)量；
目的蛋白被核酸包裹，只能使用benzonase將核酸消化，才能將蛋白釋放；
benzonase可以在低溫下消化，不會(huì )降解目的蛋白；
極高的穩定性，可以與多種細胞細菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸。
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缺陷
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1、 超聲只能打碎為大片段；
2、 處理完樣品很多還是很粘稠，不易吸取上樣；
3、 若目的蛋白被核酸包裹，無(wú)法使用超聲方法；
4、 即使在冰上操作，也會(huì )產(chǎn)熱，易降解熱敏感的蛋白；
5、 機械操作隨機性強，難評估核酸清除的有效性。
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特定酶消化特定核酸，操作繁瑣、重復性差
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親，還沒(méi)發(fā)現呢^_^~^_^
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實(shí)驗圖片：
價(jià)格：
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貨號
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規格
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包裝規格
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市場(chǎng)指導價(jià)（元）
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RPE002-50
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25KU
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50ul
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625
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RPE002-200
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100KU
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200ul
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2000
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RPE002-1000
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500KU
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1000ul
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7500
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其他品牌價(jià)格對比：
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品牌
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規格
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價(jià)格
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七海生物
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25KU（500U/ul）
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625元
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進(jìn)口品牌
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5KU
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643.5元
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進(jìn)口品牌
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10KU
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1670元
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常見(jiàn)問(wèn)題：
Q：組織樣品如何處理
A：將30~100mg動(dòng)物或植物組織研磨充分后，加入100~200μL裂解液，同時(shí)加入1~5μL全能核酸酶，室溫孵育30min，收集裂解液，離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗。
Q：大腸桿菌或其他細菌如何處理
A：細菌離心收集后，用裂解液或者研磨破碎后，每100μL加入1~5μL全能核酸酶，室溫孵育30min，收集裂解液，離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗。
Q：如何稀釋
A：正常建議稀釋比例（終濃度）為1:1000~1:20000，其中時(shí)間、溫度、稀釋比例為影響反應的正面因素。
Q：稀釋后每次用多少量，如何試梯度？起始加多少？
A：看不同的實(shí)驗要求，添加量可以按照1：100-1：10000之間。真核細胞需要量比原核細胞量高，因為真核細胞中核酸含量高真核細胞起始添加量可以按照1：1000的比例添加，原核細胞可以按照1：10000的比例添加；4℃消化DNA添加量比室溫消化DNA添加比例高，因為室溫下Benzonase酶活力更高。普通Co-IP實(shí)驗，蛋白質(zhì)表達實(shí)驗可以適當稍加，對DNA殘留要求高的實(shí)驗，可以按照1：100的比例添加。
Q：反應緩沖液
A：常用生物緩沖液，如TBS、MOPS（pH6-8）等。
Q：怎樣滅活Benzonase核酸酶？如何去除？
A：采用EDTA螯合金屬離子會(huì )可逆地抑制Benzonase核酸酶活性，極端條件會(huì )造成不可逆失活，例如：100mM NaOH，70℃處理30min等。Benzonase核酸酶可采用陰離子交換柱或氣相色譜法從目的產(chǎn)物中分離出去，由于這種核酸內切酶及其穩定，建議在終產(chǎn)物要求排除核酸酶的應用中不要使用Benzonase核酸酶。
Q：Benzonase 核酸酶與蛋白酶抑制劑混合物可以兼容嗎
A：Benzonase 核酸酶與蛋白酶抑制劑混合物是可以兼容，但是對于含有EDTA配方的蛋白酶抑制劑混合物要特別小心，EDTA濃度大于1mM時(shí)會(huì )抑制Benzonase 的活性。
